富尔根染色

　　一、实验器材及试剂

　　1、实验器材
 

　　2、主要实验试剂
 

　　二、实验步骤

　　1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗。

　　2、稀盐酸染色：配制1M的盐酸，置于60℃的烤箱中预热。将切片放入已预热好的1M的盐酸中于60℃烤箱中浸染30min，取出切片用常温的1M盐酸稍洗一下，蒸馏水洗3遍。

　　3、雪弗染色：切片入雪弗染液中暗处理60-90min，不水洗;

　　4、偏重亚硫酸钠染色：切片直接入偏重亚硫酸钠浸洗2次，每次2min，流水冲洗5min;

　　5、固绿染色：切片入固绿染液中10s至2min，无水乙醇三缸脱水。

　　6、透明封片：切片入二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明，中性树胶封片。

　　7、显微镜镜检，图像采集分析。

　　三、结果判读：

　　核DNA呈紫红色，细胞质和其他成分呈淡绿色。

　　四、注意事项：

　　1、雪弗染色前要用蒸馏水洗干净，染色时要避光。

　　2、固绿染色时，要边染边看，背景不能太深也不能过浅。