杭州浩克生物
一、实验器材及试剂
1、实验器材
| 名称 | 厂家 | 型号 |
| 脱水机 | 武汉俊杰电子有限公司 | JJ-12J |
| 包埋机 | 武汉俊杰电子有限公司 | JB-P5 |
| 病理切片机 | 上海徕卡仪器有限公司 | RM2016 |
| 冻台 | 武汉俊杰电子有限公司 | JB-L5 |
| 组织摊片机 | 浙江省金华市科迪仪器设备有限公司 | KD-P |
| 烤箱 | 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 | GFL-230 |
| 载玻片 | haokebio | |
| 正置光学显微镜 | 日本尼康 | Nikon Eclipse E100 |
| 成像系统 | 日本尼康 | Nikon DS-U3 |
2、主要实验试剂
| 试剂名称 | 厂家 | 货号 |
| 无水乙醇 | 国药集团化学试剂有限公司 | 100092683 |
| 二甲苯 | 国药集团化学试剂有限公司 | 10023418 |
| 富尔根染液套装 | haokebio | G1048 |
| 盐酸 | 国药集团化学试剂有限公司 | 10011008 |
| 中性树胶 | 国药集团化学试剂有限公司 | 10004160 |
二、实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗。
2、稀盐酸染色：配制1M的盐酸，置于60℃的烤箱中预热。将切片放入已预热好的1M的盐酸中于60℃烤箱中浸染30min，取出切片用常温的1M盐酸稍洗一下，蒸馏水洗3遍。
3、雪弗染色：切片入雪弗染液中暗处理60-90min，不水洗;
4、偏重亚硫酸钠染色：切片直接入偏重亚硫酸钠浸洗2次，每次2min，流水冲洗5min;
5、固绿染色：切片入固绿染液中10s至2min，无水乙醇三缸脱水。
6、透明封片：切片入二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明，中性树胶封片。
7、显微镜镜检，图像采集分析。
三、结果判读：
核DNA呈紫红色，细胞质和其他成分呈淡绿色。
四、注意事项：
1、雪弗染色前要用蒸馏水洗干净，染色时要避光。
2、固绿染色时，要边染边看，背景不能太深也不能过浅。
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