富尔根染色

  一、实验器材及试剂

  1、实验器材
 

名称 厂家 型号
脱水机 武汉俊杰电子有限公司 JJ-12J
包埋机 武汉俊杰电子有限公司 JB-P5
病理切片机 上海徕卡仪器有限公司 RM2016
冻台 武汉俊杰电子有限公司 JB-L5
组织摊片机 浙江省金华市科迪仪器设备有限公司 KD-P
烤箱 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 GFL-230
载玻片 haokebio  
正置光学显微镜 日本尼康 Nikon Eclipse E100
成像系统 日本尼康 Nikon DS-U3

  2、主要实验试剂
 

试剂名称 厂家 货号
无水乙醇 国药集团化学试剂有限公司 100092683
二甲苯 国药集团化学试剂有限公司 10023418
富尔根染液套装 haokebio G1048
盐酸 国药集团化学试剂有限公司 10011008
中性树胶 国药集团化学试剂有限公司 10004160

 

  二、实验步骤

  1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。

  2、稀盐酸染色:配制1M的盐酸,置于60℃的烤箱中预热。将切片放入已预热好的1M的盐酸中于60℃烤箱中浸染30min,取出切片用常温的1M盐酸稍洗一下,蒸馏水洗3遍。

  3、雪弗染色:切片入雪弗染液中暗处理60-90min,不水洗;

  4、偏重亚硫酸钠染色:切片直接入偏重亚硫酸钠浸洗2次,每次2min,流水冲洗5min;

  5、固绿染色:切片入固绿染液中10s至2min,无水乙醇三缸脱水。

  6、透明封片:切片入二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。

  7、显微镜镜检,图像采集分析。

 

  三、结果判读:

  核DNA呈紫红色,细胞质和其他成分呈淡绿色。

 

  四、注意事项:

  1、雪弗染色前要用蒸馏水洗干净,染色时要避光。

  2、固绿染色时,要边染边看,背景不能太深也不能过浅。

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