一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称 | 厂家 | 型号 |
脱水机 | 武汉俊杰电子有限公司 | JJ-12J |
包埋机 | 武汉俊杰电子有限公司 | JB-P5 |
病理切片机 | 上海徕卡仪器有限公司 | RM2016 |
冻台 | 武汉俊杰电子有限公司 | JB-L5 |
组织摊片机 | 浙江省金华市科迪仪器设备有限公司 | KD-P |
烤箱 | 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 | GFL-230 |
载玻片 | haokebio | |
正置光学显微镜 | 日本尼康 | Nikon Eclipse E100 |
成像系统 | 日本尼康 | Nikon DS-U3 |
2、主要实验试剂
试剂名称 | 厂家 | 货号 |
二甲苯 | 国药集团化学试剂有限公司 | 10023418 |
甲苯胺蓝染液 | haokebio | G1032 |
冰醋酸 | haokebio | G10000218 |
中性树胶 | 国药集团化学试剂有限公司 | 10004160 |
二、实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。
2、甲苯胺蓝染色:
植物组织切片入染液约2-5min后水洗,镜检,根据组织着色深浅进行适当的分化或者不分化,自来水洗后,将切片置于烤箱内烤干。
动物组织切片入染液5min,水洗,1%的冰醋酸稍分化,自来水洗终止反应,显微镜下控制分化程度,自来水洗后,将切片置于烤箱烤干。
3、透明封片:切片入干净的二甲苯透明5min,中性树胶封片。
4、显微镜镜检,图像采集分析。
三、结果判读:
植物组织:木质化细胞壁呈蓝绿色,纤维素细胞壁呈紫蓝色;
动物组织:脑组织尼氏体呈深蓝色,背景淡蓝色;骨组织软骨呈紫蓝色,背景浅蓝色;肠组织肥大细胞呈紫红色,细胞核呈浅蓝色,背景浅蓝色。
四、注意事项:
1、染完后的切片不能长时间放在水里,会褪色。
2、组织一定要完全烤干后再封片,避免组织残留小水珠。
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