流式细胞术

　　项目介绍

　　流式细胞术是运用流式细胞仪对细胞或颗粒进行光谱鉴定、细胞分选、计数，广泛用于分析细胞表面和细胞内分子的表达水平、鉴定样品中细胞群的不同细胞类型、评估各细胞亚群的纯度以及分析细胞大小和内含颗粒。主要利用荧光标记的抗体检测蛋白水平，或结合了特定细胞分子的荧光染料，如PI与 DNA 的结合。

　　应用

　　常用于细胞表面分子如表面标记物的鉴定及水平分析，以鉴定、定性或定量特定类群的细胞，可以检测细胞内蛋白表达水平，可以利用特定染料分析细胞周期、细胞凋亡，利用线粒体电位染料分析线粒体膜电位，利用DHE等染料检测细胞内ROS水平。

　　流式细胞仪通道

　　流式细胞仪Beckman Coulter CytoFLEX；光学参数：FSC（前散射）、SSC（侧散射）、4色荧光通道；数据采集软件：CytExpert。

　　结果展示

细胞周期

细胞凋亡

ROS检测

JC-1线粒体膜电位

　　样品保存运输

　　1、流式样本接收注意事项

　　1.1 细胞凋亡

　　需要活细胞(外地样本不接)。如果细胞带荧光，一定要在交接单和培养板上备注，否则按照无荧光处理。如果因此导致检测结果不可用及样本浪费，我方概不负责，也不接受退单。

　　1.2 细胞周期

　　周期需要细胞量比较多，6 孔板送样要求汇合度在70%，但不能超过90%。外地样品，需用预冷的70% 乙醇固定过夜后，加2ml PBS，封口膜封好，4℃运输寄到实验室。如果运输时间较短(2 天内可到)，可直接加70% 乙醇后寄过来。

　　1.3 流式JC-1

　　需要活细胞(外地样本不接)。细胞汇合度高于70%(6 孔板)，多提供2 个空白孔，做阴性和阳性对照。如果细胞带红光或绿光，不能检测。

　　1.4 流式ROS

　　需要活细胞(外地样本不接)。细胞汇合度高于70%(6 孔板)，多提供2 个空白孔，做阴性和阳性对照。如果细胞带绿光，不能检测。

　　1.5 细胞表抗

　　提前确定公司是否有相应流式抗体(组化抗体不可用)，其他抗体需要客户自己提供(外地样本不接)。

　　1.6 流式三标

　　提前告知样本具体数量和类型(血液或脾脏~)。血样用抗凝管收集(胞内染色至少需要1.5 ml，表抗需要约1 ml)，注意防止凝血，4℃保存运输。血样4℃保存最多只能存放一周，时间越久实验结果越差。取血后，需尽快寄到实验室;取脾脏时尽量将动物带到实验室，直接在实验室取材后开始实验，若不能将动物带到实验室，取材(整个脾脏)后将组织放在含有PBS 的EP 管或离心管中，4℃保存，提细胞必须在取材后6 小时以内完成，注意有些检测指标(Treg,TH1, TH2 等)需无菌提取。外地样本不接。

　　价格