Von kossa染色

　　一、实验器材及试剂

　　1、实验器材

　　2、主要实验试剂

　　二、实验步骤

　　1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗，蒸馏水洗三遍。

　　2、XSY反应：切片滴加XSY溶液，用紫外灯连续照射2-3小时，蒸馏水洗多遍;

　　3、苏木素染色：切片入苏木素染液染3-5min，自来水洗，分化液分化，自来水洗，返蓝液返蓝，流水冲洗。

　　4、伊红染色：85%、95%的酒精梯度脱水各5min，入伊红染液5min;

　　5、脱水封片：切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明，中性树胶封片。

　　6、显微镜镜检，图像采集分析。

　　三、染色判读：

　　钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色，细胞核呈蓝色，背景呈红色。

　　四、注意事项：

　　1、XSY溶液滴染前，切片必须用蒸馏水洗干净;

　　2、如果没有紫外灯，也可以用强太阳光照射。