一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称 | 厂家 | 型号 |
脱水机 | 武汉俊杰电子有限公司 | JJ-12J |
包埋机 | 武汉俊杰电子有限公司 | JB-P5 |
病理切片机 | 上海徕卡仪器有限公司 | RM2016 |
冻台 | 武汉俊杰电子有限公司 | JB-L5 |
组织摊片机 | 浙江省金华市科迪仪器设备有限公司 | KD-P |
烤箱 | 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 | GFL-230 |
载玻片 | haokebio | |
正置光学显微镜 | 日本尼康 | Nikon Eclipse E100 |
成像系统 | 日本尼康 | Nikon DS-U3 |
2、主要实验试剂
试剂名称 | 厂家 | 货号 |
无水乙醇 | 国药集团化学试剂有限公司 | 100092683 |
二甲苯 | 国药集团化学试剂有限公司 | 10023418 |
Movat五色法染液套装 | haokebio | G1049 |
中性树胶 | 国药集团化学试剂有限公司 | 10004160 |
二、实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。
2、阿利新蓝染色:切片入阿利新蓝染液中染色15min,自来水洗2min;
3、碱性乙醇分化:切片入热的碱性乙醇(60℃预热30min)中分化约3-5s,至无多余染液流下,自来水洗;
3、Weigert苏木精染色:将苏木精溶液:氯化铁溶液:碘溶液=3:2:1混匀成染色液,切片入该染液避光染色30min,分化液分化,流水冲洗5min;
5、番红O-酸性品红染色:将番红O:酸性品红=4:1混合,切片入该染液3-5min,自来水稍洗;
6、磷钼酸染色:切片入磷钼酸1-2min;
7、冰醋酸染色:切片不水洗,直接入冰醋酸2-5min,自来水稍洗;
8、天狼猩红染色:切片入天狼猩红染液2min,2-3缸无水乙醇快速脱水;
9、透明封片:切片入二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。
10、显微镜镜检,图像采集分析。
三、结果判读:
蛋白聚糖呈蓝绿色,弹力纤维和细胞核呈黑色,胶原纤维呈红色,肌纤维呈黄色,泡沫细胞呈紫色。
四、注意事项:
1、碱性乙醇分化时在显微镜下控制,至阳性明显,无多余染液流下。
2、天狼猩红染色时,需要严格控制时间,避免染色时间太长致使黑色的弹力纤维褪色。
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