movat五色染色

  一、实验器材及试剂

  1、实验器材

名称 厂家 型号
脱水机 武汉俊杰电子有限公司 JJ-12J
包埋机 武汉俊杰电子有限公司 JB-P5
病理切片机 上海徕卡仪器有限公司 RM2016
冻台 武汉俊杰电子有限公司 JB-L5
组织摊片机 浙江省金华市科迪仪器设备有限公司 KD-P
烤箱 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 GFL-230
载玻片 haokebio  
正置光学显微镜 日本尼康 Nikon Eclipse E100
成像系统 日本尼康 Nikon DS-U3

  2、主要实验试剂

试剂名称 厂家 货号
无水乙醇 国药集团化学试剂有限公司 100092683
二甲苯 国药集团化学试剂有限公司 10023418
Movat五色法染液套装 haokebio G1049
中性树胶 国药集团化学试剂有限公司 10004160

 

  二、实验步骤

  1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。

  2、阿利新蓝染色:切片入阿利新蓝染液中染色15min,自来水洗2min;

  3、碱性乙醇分化:切片入热的碱性乙醇(60℃预热30min)中分化约3-5s,至无多余染液流下,自来水洗;

  3、Weigert苏木精染色:将苏木精溶液:氯化铁溶液:碘溶液=3:2:1混匀成染色液,切片入该染液避光染色30min,分化液分化,流水冲洗5min;

  5、番红O-酸性品红染色:将番红O:酸性品红=4:1混合,切片入该染液3-5min,自来水稍洗;

  6、磷钼酸染色:切片入磷钼酸1-2min;

  7、冰醋酸染色:切片不水洗,直接入冰醋酸2-5min,自来水稍洗;

  8、天狼猩红染色:切片入天狼猩红染液2min,2-3缸无水乙醇快速脱水;

  9、透明封片:切片入二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。

  10、显微镜镜检,图像采集分析。

 

  三、结果判读:

  蛋白聚糖呈蓝绿色,弹力纤维和细胞核呈黑色,胶原纤维呈红色,肌纤维呈黄色,泡沫细胞呈紫色。

 

  四、注意事项:

  1、碱性乙醇分化时在显微镜下控制,至阳性明显,无多余染液流下。

  2、天狼猩红染色时,需要严格控制时间,避免染色时间太长致使黑色的弹力纤维褪色。

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