流式PI染色

　　一、实验原理

　　PI是一种溴化乙啶的类似物，能够与DNA强力结合，它在嵌入双链DNA后释放红色荧光。尽管PI不能通过活细胞膜，但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。可根据此原理，采用流式细胞仪对活死细胞进行鉴定及分析。

　　二、实验步骤

　　(1)收集细胞，PBS洗涤一次，2000rpm离心5min，用PBS重悬细胞，调整细胞密度约为106个/ml。

　　(2)取500μl细胞悬液，加入5μl PI染液。

　　(3)4°C避光放置30 min。

　　(4)流式细胞仪检测。

　　三、结果观察

　　流式检测用氩离子激发荧光，激发波长为488nm，发射光波长大于630nm。

　　结果说明：被直线隔开的两个象限，上方为死细胞群及比例，下方为活细胞群及比例。