流式PI染色

  一、实验原理

  PI是一种溴化乙啶的类似物,能够与DNA强力结合,它在嵌入双链DNA后释放红色荧光。尽管PI不能通过活细胞膜,但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。可根据此原理,采用流式细胞仪对活死细胞进行鉴定及分析。

  二、实验步骤

  (1)收集细胞,PBS洗涤一次,2000rpm离心5min,用PBS重悬细胞,调整细胞密度约为106个/ml。

  (2)取500μl细胞悬液,加入5μl PI染液。

  (3)4°C避光放置30 min。

  (4)流式细胞仪检测。

  三、结果观察

  流式检测用氩离子激发荧光,激发波长为488nm,发射光波长大于630nm。

流式PI染色

  结果说明:被直线隔开的两个象限,上方为死细胞群及比例,下方为活细胞群及比例。

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