细胞爬片

细胞培养转染 6180

  简介:

  细胞爬片就是让玻片浸在细胞培养基内,细胞在玻片上生长,主要用于免疫荧光,免疫组织化学,冰冻切片,细胞涂片,原位杂交等。

  实验步骤:

  【细胞爬片】步骤

  1、将盖玻片用洗洁剂清洗干净,然后用自来水将洗洁剂冲洗干净,再用纯水冲洗三遍,75%的酒精中静置浸泡10min。

  2、用镊子夹起盖玻片在酒精灯上将酒精烧干,温度不可太高。

  3、将烧干的盖玻片放在六孔板中,待冷却后在6孔板中先加入2ml完全培养基,后加入细胞悬液,轻轻上下左右晃动,后置于37℃ 5% CO2 培养箱中培养。

  注意事项:避免细胞靠近壁边缘密度要高些,而处于中央玻片上爬的细胞数量相对较少。比较好的做法是将玻片放入孔板的孔内后,加细胞悬液时只滴到玻片上,一直滴到液体布满整个玻片又不会溢出玻片边缘,放在培养箱里,等细胞贴壁后,取出,再滴加培养基布满整个孔底,继续培养,这样玻片上的细胞生长的密度就会很集中。

  【细胞爬片的固定】

  细胞爬片取出后,一般用PBS洗1-2遍,然后再做固定。常用4%多聚甲醛、95%乙醇等固定后,4℃保存。

  客户提供信息:

  1.细胞英文名称;

  2.培养条件;

  3.是否贴壁:贴壁细胞制作爬片,悬浮细胞只能做滴片或涂片;

  4.实验要求

  样本寄送须知:

  1.活细胞:一定要不透气方瓶寄,常温;

  2.冻存细胞:纯干冰件,保证干冰充足

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