细胞爬片

　　简介：

　　细胞爬片就是让玻片浸在细胞培养基内，细胞在玻片上生长，主要用于免疫荧光，免疫组织化学，冰冻切片，细胞涂片，原位杂交等。

　　实验步骤：

　　【细胞爬片】步骤

　　1、将盖玻片用洗洁剂清洗干净，然后用自来水将洗洁剂冲洗干净，再用纯水冲洗三遍，75%的酒精中静置浸泡10min。

　　2、用镊子夹起盖玻片在酒精灯上将酒精烧干，温度不可太高。

　　3、将烧干的盖玻片放在六孔板中，待冷却后在6孔板中先加入2ml完全培养基，后加入细胞悬液，轻轻上下左右晃动，后置于37℃ 5% CO2 培养箱中培养。

　　注意事项：避免细胞靠近壁边缘密度要高些，而处于中央玻片上爬的细胞数量相对较少。比较好的做法是将玻片放入孔板的孔内后，加细胞悬液时只滴到玻片上，一直滴到液体布满整个玻片又不会溢出玻片边缘，放在培养箱里，等细胞贴壁后，取出，再滴加培养基布满整个孔底，继续培养，这样玻片上的细胞生长的密度就会很集中。

　　【细胞爬片的固定】

　　细胞爬片取出后，一般用PBS洗1-2遍，然后再做固定。常用4%多聚甲醛、95%乙醇等固定后，4℃保存。

　　客户提供信息：

　　1.细胞英文名称;

　　2.培养条件;

　　3.是否贴壁：贴壁细胞制作爬片，悬浮细胞只能做滴片或涂片;

　　4.实验要求

　　样本寄送须知：

　　1.活细胞：一定要不透气方瓶寄，常温;

　　2.冻存细胞：纯干冰件，保证干冰充足