瑞士吉姆萨染色

  一、实验器材及试剂

  1、实验器材
 

名称 厂家 型号
离心机 DRAGONLAB D3024R
载玻片 haokebio  
正置光学显微镜 日本尼康 Nikon Eclipse E100
成像系统 日本尼康 Nikon DS-U3

  2、主要实验试剂
 

试剂名称 厂家 货号
二甲苯 国药集团化学试剂有限公司 10023418
瑞氏吉姆萨染液套装 haokebio G1007
中性树胶 国药集团化学试剂有限公司 10004160

 

  二、实验步骤

  1、涂片制备:取细胞悬液,离心,弃上清液,加适量PBS缓冲液,混匀后取适量滴于载玻片前端,另取一块边缘光滑的载玻片做推片,将其一端置于液滴前方,向后移动至接触液滴使液滴均匀分散在推片与载片的接触处。然后呈30-40°角均匀用力向另一端平稳地推出。涂片放置自然晾干。

  2、瑞士吉姆萨染色:瑞氏吉姆萨染液盖满标本30秒,再加入2-3倍体积的PBS染液1-3min,倾去染液,蒸馏水洗净,镜检,快速烤干。

  3、透明封片:干净的二甲苯5min,中性树胶封片。

  4、显微镜镜检,图像采集分析。

 

  三、结果判读:

  红细胞数量多,体积小,无核,呈粉色或肉粉色;嗜中性粒细胞体积略大于红细胞,细胞核呈紫蓝色分叶状,细胞质几乎无色;嗜酸性粒细胞体积略大于嗜中性粒细胞,细胞核呈紫色,通常为2叶,细胞质充满嗜酸性颗粒呈红色;嗜碱性粒细胞体积略小于嗜酸性粒细胞,细胞质内有大小不等被染成紫色的嗜碱性颗粒,核1-2叶,胞质染成淡蓝色。

  淋巴细胞圆形,体积与红细胞相似,核致密染成深紫色。单核细胞体积最大,细胞质染成灰蓝色,核呈肾型或马蹄型染成紫蓝色。血小板呈红色小颗粒。

 

  四、注意事项:

  1、制作良好的涂片要求厚薄适宜,分布均匀,边沿整齐。

  2、制作的涂片需要充分干燥以防脱片。

  3、染色时间可根据染液浓度,室温高低,细胞多少来进行调节。

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