抗酸染色

  抗酸染色实验报告

 

  一、实验器材及试剂

  1、实验器材

名称 厂家 型号
脱水机 武汉俊杰电子有限公司 JJ-12J
包埋机 武汉俊杰电子有限公司 JB-P5
病理切片机 上海徕卡仪器有限公司 RM2016
冻台 武汉俊杰电子有限公司 JB-L5
组织摊片机 浙江省金华市科迪仪器设备有限公司 KD-P
烤箱 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 GFL-230
载玻片 haokebio  
正置光学显微镜 日本尼康 Nikon Eclipse E100
成像系统 日本尼康 Nikon DS-U3

  2、主要实验试剂

试剂名称 厂家 货号
无水乙醇 国药集团化学试剂有限公司 100092683
二甲苯 国药集团化学试剂有限公司 10023418
抗酸染液套装 haokebio G1047
苏木素染液 haokebio G1004
分化液 servicebio G1005-3
返蓝液 servicebio G1005-4
中性树胶 国药集团化学试剂有限公司 10004160

 

  二、实验步骤

  1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,水洗。

  2、抗酸染色:切片入抗酸染液中染色30min,流水冲洗;

  3、背景分化:切片入1%的盐酸酒精快速分化1s,流水冲洗2min,镜检有无紫红色阳性菌;

  4、硫酸分化:切片入硫酸快速分化1s,自来水洗,重复操作至阳性菌呈紫红色,背景无色。

  5、苏木素染色:切片入苏木素染液染3-5min,自来水洗,分化液分化,自来水洗,返蓝液返蓝,流水冲洗。

  6、脱水封片:切片依次放入无水乙醇I 5min-无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min-二甲苯Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。

  7、显微镜镜检,图像采集分析。

 

  三、结果判读:

  抗酸菌呈紫红色丝状,细胞核呈浅蓝色。

 

  四、注意事项:

  1、两次分化都应注意分化程度,分化过度,将抗酸菌的紫红色分掉,分化不足,背景红色。

  2、苏木素复染过程中要浅染,不能影响抗酸菌的观察。

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