抗酸染色

　　抗酸染色实验报告

　　一、实验器材及试剂

　　1、实验器材

　　2、主要实验试剂

　　二、实验步骤

　　1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，水洗。

　　2、抗酸染色：切片入抗酸染液中染色30min，流水冲洗;

　　3、背景分化：切片入1%的盐酸酒精快速分化1s，流水冲洗2min，镜检有无紫红色阳性菌;

　　4、硫酸分化：切片入硫酸快速分化1s，自来水洗，重复操作至阳性菌呈紫红色，背景无色。

　　5、苏木素染色：切片入苏木素染液染3-5min，自来水洗，分化液分化，自来水洗，返蓝液返蓝，流水冲洗。

　　6、脱水封片：切片依次放入无水乙醇I 5min-无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min-二甲苯Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明，中性树胶封片。

　　7、显微镜镜检，图像采集分析。

　　三、结果判读：

　　抗酸菌呈紫红色丝状，细胞核呈浅蓝色。

　　四、注意事项：

　　1、两次分化都应注意分化程度，分化过度，将抗酸菌的紫红色分掉，分化不足，背景红色。

　　2、苏木素复染过程中要浅染，不能影响抗酸菌的观察。