染色原理及应用
ROS(reactive oxygen species)即活性氧自由基,主要包括活性氧族如超氧阴离子自由基(O2-·)、过氧化氢(H2O2)、羟自由基(OH·)和单线态氧,通常是有氧代谢的副产物。在病理条件下,由于活性氧的产生和清除失去了正常平衡,会对组织细胞造成损伤。
二氢乙锭(Dihydroethidium, DHE),可自由透过活细胞进入细胞内,并被细胞内的ROS氧化,形成氧化乙锭;氧化乙锭可掺入染色体DNA中,产生红色荧光。根据活细胞中红色荧光的产生,可以判断细胞ROS含量的多少和变化。检测ROS水平常用于凋亡、衰老、自噬、炎症、缺血再灌注损伤、神经退行疾病等领域的研究。
ROS染色是活氧检测,组织冰冻切片不能用固定液固定,最好是新鲜组织。
结果展示
ROS阴性细胞仅有较低的荧光强度,ROS阳性细胞有较强的红色荧光。
样品保存运输
实验项目 | 标本要求 | 标本保存运输条件 | 可能存在风险 | 建议 |
ROS(活性氧) | 新鲜或冷冻组织冰冻切片或 活细胞 | 冰冻切片-20℃ 保存。如果要做活细胞染色, 则提供瓶装细胞,给我们公司细胞房培养, 制成爬片。 | 活细胞实验操作过程中可能会脱落,尤其是做过药物或损伤等处理的细胞脱落更严重,实验结果可能存在细胞较少的情况 | 在我司培养细胞及处理。 |
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