简介:引物,是指在核苷酸聚合作用起始时,刺激合成的一种具有特定核苷酸序列的大分子,与反应物以共价键形式连接。

  mRNA和lncRNA的引物设计是围绕目的片段的上下游分别设计PCR引物;

  circRNA引物设计是针对环化位点设计的发散性引物;

  miRNA引物设计是针对成熟序列设计的茎环引物,每个反向引物的都带有一段固定的序列,可以形成一个茎环;每个正向引物也带有一段固定的序列。

  周期:3个工作日

  要求:基因名称和种属、或已知引物序列、或基因ID号;miRNA需要知道设计3p还是5p,可以参考相关文献(以人的gapdh设计为例,如图)
 

探针引物合成(taqmanPCR)
 

探针引物合成(taqmanPCR)
 

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