OCT包埋

  实验步骤

  1、取材当天把所有需要包埋的组织放入4%多聚甲醛过夜;

  2、将包埋筐放入15%蔗糖溶液过夜(4℃存放),再将包埋筐放入30%蔗糖溶液过夜(4℃存放)

  3、“沉糖”完成后,可进行冰冻包埋;

  4、将包埋组织放于托盘在(托盘用锡箔纸包裹);

  将托盘放入液氮中,浸没组织,持续3-5s后捞出,如此重复3-4次左右,待脑组织从半透明变为白色即可

  组织经过液氮速冻后立即用锡箔纸包裹(标注实验编号),放入-80℃;

  切片之前30min将组织从-80℃冰箱中取出,放入-20℃冰箱中解冻;

  解冻后用OCT胶包埋组织(包埋时确保需要切片的那一面朝上)放入冰冻包埋机中,20min左右即可切片。

  实验结果

  将包埋的组织分组分盒放于-80℃深冻冰箱。

  注意事项

  1、用OCT胶包埋组织时要均匀,不要留有气泡;

  2、包埋时去额叶半脑按照"冠状切面额极朝上放至并包埋”,一侧的小脑脑干按照“时装切面,中线面朝上放至、包埋”

  心肺肝肾等组织按照“水平切面,横截面较小侧向前放置、包埋”;

  3、“沉糖”的时间不宜过长

 

  1.准备一个托盘

OCT包埋
 

  2.加一层包埋剂,控制好包埋面积,做到刚好比组织大一圈

OCT包埋

  3.等几秒钟,在包埋剂底部有一层凝结时将组织放入包埋剂中央

OCT包埋
 

  4.吸出气泡,气泡会影响切片

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  5.再覆盖一层包埋剂,注意不能加多,否则会溢出。待包埋剂完全凝固就可以开始切片
 

OCT包埋

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