OCT包埋

　　实验步骤

　　1、取材当天把所有需要包埋的组织放入4%多聚甲醛过夜;

　　2、将包埋筐放入15%蔗糖溶液过夜(4℃存放)，再将包埋筐放入30%蔗糖溶液过夜(4℃存放)

　　3、“沉糖”完成后，可进行冰冻包埋;

　　4、将包埋组织放于托盘在(托盘用锡箔纸包裹);

　　将托盘放入液氮中，浸没组织，持续3-5s后捞出，如此重复3-4次左右，待脑组织从半透明变为白色即可

　　组织经过液氮速冻后立即用锡箔纸包裹(标注实验编号)，放入-80℃;

　　切片之前30min将组织从-80℃冰箱中取出，放入-20℃冰箱中解冻;

　　解冻后用OCT胶包埋组织(包埋时确保需要切片的那一面朝上)放入冰冻包埋机中，20min左右即可切片。

　　实验结果

　　将包埋的组织分组分盒放于-80℃深冻冰箱。

　　注意事项

　　1、用OCT胶包埋组织时要均匀，不要留有气泡;

　　2、包埋时去额叶半脑按照"冠状切面额极朝上放至并包埋”，一侧的小脑脑干按照“时装切面，中线面朝上放至、包埋”

　　心肺肝肾等组织按照“水平切面，横截面较小侧向前放置、包埋”;

　　3、“沉糖”的时间不宜过长

　　1.准备一个托盘

　　2.加一层包埋剂，控制好包埋面积，做到刚好比组织大一圈

　　3.等几秒钟，在包埋剂底部有一层凝结时将组织放入包埋剂中央

　　4.吸出气泡，气泡会影响切片

　　5.再覆盖一层包埋剂，注意不能加多，否则会溢出。待包埋剂完全凝固就可以开始切片