【产品简介】
免疫显色试剂是二步法免疫组化试剂盒,适合与兔或鼠源一抗配用。其主要过程为,一抗 与切片中的靶抗原形成抗原抗体复合物,酶标羊抗鼠/兔 IgG 聚合物与抗原抗体复合物中的一抗 结合,再利用辣根过氧化物酶催化二氨基联苯胺 (DAB) 在抗原部位形成棕色显色。由于该系统 不含生物素和链亲和素,所以不受内源性生物素干扰,染色背景非常清晰。
【产品组成 】
产品组分 | 50T | 200T | 500T | 1000T |
试剂 A | DAB 色原 (20x) | 0.25mL | 1mL | 5mL | 5mL |
试剂 B | DAB 缓冲液 | 10mL | 20mL | 50mL | 100mL |
【储存与运输】
本试剂需低温运输,贮存于 4℃低温环境,有效期一年
【使用方法】
常规脱蜡水化:
石蜡切片经常规脱蜡和水化。
抗原热修复:
参照一抗说明书进行抗原修复。
DAB 工作液的配制:
按每毫升 DAB 缓冲液 (试剂 B) 中加入 50 μL DAB 色原 (试剂 A) (约 1 滴) 的比例配制 DAB 工作液,DAB 工作液应现配现用。配制好的 DAB 工作液需在 2 小时内使用,如出现沉淀, 使用前先混匀。
操作步骤:
1) 抗原修复完毕后自然冷却的切片,用自来水清洗。
2) 除去切片上组织周围的液体,用免疫组化笔圈定玻片上的待测组织区域并放入 PBST 缓 冲液中。
3) 取出切片,除去 PBST 缓冲液,滴加内源性过氧化物酶阻断剂 (视切片大小以完全覆盖 切片组织为宜) ,于组织上孵育 10 分钟,用 PBST 清洗切片。
4)除去 PBST 缓冲液,滴加 100μL 左右一抗工作液(视切片大小以完全覆盖切片组织为宜), 于组织上进行孵育 (按照各自一抗说明书操作) 。一抗孵育完毕,用 PBST 清洗切片。
5) 除去 PBST 缓冲液,每张切片加酶标羊抗鼠/兔 IgG 聚合物 100μL 左右 (视切片大小以 完全覆盖切片组织为宜) ,室温下孵育 30 分钟。PBST 缓冲液清洗切片。
6) 用预备好的 DAB 工作液进行显色,每张切片加 100μL 左右 DAB 工作液 (视切片大小以 完全覆盖切片组织为宜) ,显色时间为 1-5 分钟 (镜检控制染色) ,用自来水冲洗终止显色反 应。
7) 需要时,使用苏木素染液复染。
8) 切片经过脱水,透明,封片。
注:若将本试剂应用于自动检测平台,需根据实际情况确认使用条件。
【注意事项】
1.本免疫显色试剂仅用于体外诊断,不作其他用途。
2.开始实验前,应仔细阅读此说明书。
3.请在试剂盒有效期内使用。
4.本免疫显色试剂仅限有专业经验或经专业培训的人员使用。
5.操作时请穿实验服,并佩戴一次性手套。
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