一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿,AF488)

Edu染色试剂盒 产品 组化 7210
一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿,AF488)

一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿,AF488)

  • 价格¥1500
  • 规格50T
  • 货号HKI0010
  • 单位
  • 品牌HaoKebio

产品介绍
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品牌商品编码商品名称规格价格
HaoKebioHKI0010一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿,AF488)50T¥1500

【产品简介】
细胞在发生凋亡时,会激活一些 DNA 内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组 DNA。 细胞凋亡时抽提 DNA 进行电泳检测,可以发现 180-200bp 的 DNAladder。基因组 DNA 断裂时, 暴露的 3′-OH 可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TerminalDeoxynucleotidyl  Transferase,TdT) 的催化下加上绿色 AF488 标记的dUTP,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就 是 TUNEL(TdT-mediated  dUTPNick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理

【储存与运输】
冰袋运输,-20˚C 储存,可稳定储存一年。

【使用方法】

石蜡切片荧光tunel实验步骤

石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯 Ⅰ 15min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇 Ⅰ5min-无水 乙醇Ⅱ5min,取出置于通风厨内等酒精晾干后放入自来水中稍洗,蒸馏水洗。(冬天应提高脱蜡 温度或适当延长脱蜡时间)

通透:pH6.0 柠檬酸修复液中火修复8min ,室温冷却,用免疫组化笔划圈,之后纯水洗三 次(重要)。  (通透方式有多钟:1 蛋白酶消化,2tritonx100 通透剂通透,柠檬酸修复)

配试剂工作液以及孵育:荧光反应液和 TdT 酶按 50:1 比例混合,此液为 tunel 工作液,, 将 tunel 工作液加入到圈内覆盖组织,切片平放于湿盒内,37℃恒温箱孵育 1 到 2 小时,湿盒 内加少量水保持湿度。

DAPI 复染细胞核:切片用 PBS (PH7.4) 洗涤 3 次,每次 5min。去除 PBS 后在圈内滴加 DAPI 染液,避光室温孵育 10min。

封片:玻片置于 PBS (PH7.4) 中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次,每次5min。切片稍甩干后用 抗荧光淬灭封片剂封片。

镜检拍照:切片于尼康倒置荧光显微镜下观察并采集图像。

石蜡切片荧光tunel结果判读

DAPI 染出来的细胞核在紫外的激发下为蓝色,试剂盒为 AF488 标记,阳性凋亡细胞核为绿 色。

【注意事项】

1. 本试剂仅供科研。

2. 操作时请穿实验服,佩戴一次性手套。

暂无

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