荧光三标信号放大试剂盒
(石蜡切片适用)
货号:HKI0000-3
【产品信息】
产品名称 | 产品货号 | 50T | 100T | 有效期 |
Flare520 | HKI0014 | 2.5ml | 5ml | 12 个月 |
Flare570 | HKI0015 |
Flare690 | HKI0017 |
HRP超敏山羊抗兔鼠通用二抗 | HKI0029 |
DAPI染色液(即用型) | HKI0005 |
抗荧光淬灭封片剂 | HKI0007 |
TSA荧光信号增强剂 | HKI0046 | 25ul | 50ul |
【产品简介】
酪酰胺信号放大(TSA)系统可用于检测荧光免疫细胞化学(ICC)、免疫组织化学(IHC) 中的低丰度靶点,可将信号灵敏度提高100倍。TSA 荧光试剂盒使用辣根过氧化物酶(HRP)直接催化固定化酶周围的荧光基团共价沉积,形成永久性共价键结合。在运用HRP二抗及一抗在微波热修复条件下脱离掉抗原失活的原理,重复此过程,即可实现同种属荧光双标及荧光三标以及多标(注:此过程仅适用于石蜡切片的荧光多标)。
此试剂盒中的荧光探针可单独或配合使用。可以实现单标、双标、三标或荧光放大等功能不受一抗种属的影响,极大丰富了荧光多色的内容。
【储存与运输】
冰袋(wet ice)运输;-20℃长期保存,短期于4℃保存,有效期 12 个月。
【使用方法】
1.脱蜡至水
依次将切片放入二甲苯Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ8min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-95%酒精
5min-85%酒精5min-蒸馏水洗。
2.抗原修复(必须为抗原热修复)
组织切片置于盛满抗原修复缓冲液(PHxx)(货号:HKI0001/0002/0003/0004)的修复盒中于微波炉内进行抗原修复。中火8min至沸腾后断电间隔8min中低火 7min至沸,此过程中应防止缓冲液过度蒸发,切勿干片。(可自行摸索)
3.阻断内源性过氧化物酶和血清封闭
切片加上过氧化物酶阻断剂(货号:HKI0047),室温孵育25min,PBS洗涤后,在组化圈内滴加封闭液(货号:HKW2085/86/87/99)均匀覆盖组织,室温封闭30min。
4.加一抗体二抗
在切片上滴加用通用抗体稀释液(货号:HKW2083)按一定比例稀释的一抗,切片平放于湿盒4℃过夜孵育。加二抗:切片稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的二抗覆盖组织,避光室温孵育50min。(也可使用普通二抗,超敏二抗效果更佳)。
5.加TSA 信号放大试剂
根据需要标记的荧光颜色加对应的TSA 放大试剂,孵育3-10min可具体根据预实验条件。如遇标记效果差的可添加荧光增强剂进一步加强,增强剂:荧光试剂1:500正常孵育,浓度也可摸索使用。
6.重复抗原修复从步骤2可进行多色标记
7.DAPI复染细胞核
8.抗荧光淬灭剂封片
9.相应荧光通道拍照或扫描
【注意事项】
- 本产品仅作科研用途。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
HRP超敏山羊抗兔鼠通用二抗属于附赠试剂,不足100T剂量,可根据需要回购。
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