荧光双标信号放大试剂盒(石蜡切片适用)

货号：HKI0000-2

【产品信息】

【产品简介】

酪酰胺信号放大 (TSA) 系统可用于检测荧光免疫细胞化学 (ICC) 、免疫组织化学 (IHC) 中的低丰度靶点，可将信号灵敏度提高100倍。TSA 荧光试剂盒使用辣根过氧化物酶 (HRP) 直 接催化固定化酶周围的荧光基团共价沉积，形成永久性共价键结合。在运用HRP二抗及一抗在微 波热修复条件下脱离掉抗原失活的原理，重复此过程，即可实现同种属荧光双标及荧光三标以 及多标 (注：此过程仅适用于石蜡切片的荧光多标) 。

此试剂盒中的荧光探针可单独或配合使用。可以实现单标、双标或荧光放大等功能不受 一抗种属的影响，极大丰富了荧光多色的内容。

【储存与运输】

冰袋 (wet ice) 运输；-20℃长期保存,短期于4℃保存，有效期 12 个月。

【使用方法】

1.脱蜡至水

依次将切片放入二甲苯 Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ8min-无水乙醇 Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-95%酒精 5min-85%酒精5min-蒸馏水洗。

2.抗原修复 (必须为抗原热修复)

组织切片置于盛满抗原修复缓冲液 (PHxx)  (货号：HKI0001/0002/0003/0004) 的修复盒中于 微波炉内进行抗原修复。中火8min至沸腾后断电间隔8min中低火 7min至沸，此过程中应防止缓冲 液过度蒸发，切勿干片。  (可自行摸索)

3.阻断内源性过氧化物酶和血清封闭

切片加上过氧化物酶阻断剂 (货号：HKI0047) ，室温孵育25min，PBS洗涤后，在组化圈内滴加封闭液 (货号：HKW2085/86/87/99) 均匀覆盖组织，室温封闭30min。

4.加一抗、二抗

在切片上滴加用通用抗体稀释液 (货号：HKW2083) 按一定比例稀释的一抗，切片平放于湿盒4℃ 过夜孵育。加二抗：切片稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的二抗覆盖组织，避光室温孵育 50min。  (也可使用普通二抗，超敏二抗效果更佳) 。

5.加TSA 信号放大试剂

根据需要标记的荧光颜色加对应的TSA 放大试剂，孵育3-10min可具体根据预实验条件。如遇 标记效果差的可添加荧光增强剂进一步加强，增强剂:荧光试剂1:500正常孵育，浓度也可摸 索使用。

6 . 重复抗原修复从步骤 2可进行多色标记

7 . D A P I 复 染 细 胞 核

8 . 抗 荧 光 淬 灭 剂 封 片

9 . 相应荧光通道拍照或扫描

【注意事项】

1.本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3.HRP超敏山羊抗兔鼠通用二抗属于附赠试剂，不足100T剂量，可根据需要回购。

4.样本来源为兔 (或小鼠) ，若出现较高非特异性荧光着色，一抗为兔抗 (或鼠抗) 时，可 采用HRP标记的山羊抗兔IgG(货号：HKS23303) 或HRP标记的山羊抗小鼠IgG (HKS23301) 。