荧光双标信号放大试剂盒(石蜡切片适用)
货号:HKI0000-2
【产品信息】
产品名称 | 产品货号 | 规格 | 有效期 |
Flare520 | HKI0014 | 5 ml/100T | 2.5 ml/50T | 1.25 ml/25T | 12 个月 |
Flare570 | HKI0015 |
HRP超敏山羊抗兔鼠通用二抗 | HKI0029 |
DAPI染色液 (即用型) | HKI0005 |
抗荧光淬灭封片剂 | HKI0007 | 2ml |
TSA荧光信号增强剂 | HKI0046 | 50ul | 25ul | 12ul |
【产品简介】
酪酰胺信号放大 (TSA) 系统可用于检测荧光免疫细胞化学 (ICC) 、免疫组织化学 (IHC) 中的低丰度靶点,可将信号灵敏度提高100倍。TSA 荧光试剂盒使用辣根过氧化物酶 (HRP) 直 接催化固定化酶周围的荧光基团共价沉积,形成永久性共价键结合。在运用HRP二抗及一抗在微 波热修复条件下脱离掉抗原失活的原理,重复此过程,即可实现同种属荧光双标及荧光三标以 及多标 (注:此过程仅适用于石蜡切片的荧光多标) 。
此试剂盒中的荧光探针可单独或配合使用。可以实现单标、双标或荧光放大等功能不受 一抗种属的影响,极大丰富了荧光多色的内容。
【储存与运输】
冰袋 (wet ice) 运输;-20℃长期保存,短期于4℃保存,有效期 12 个月。
【使用方法】
1.脱蜡至水
依次将切片放入二甲苯 Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ8min-无水乙醇 Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-95%酒精 5min-85%酒精5min-蒸馏水洗。
2.抗原修复 (必须为抗原热修复)
组织切片置于盛满抗原修复缓冲液 (PHxx) (货号:HKI0001/0002/0003/0004) 的修复盒中于 微波炉内进行抗原修复。中火8min至沸腾后断电间隔8min中低火 7min至沸,此过程中应防止缓冲 液过度蒸发,切勿干片。 (可自行摸索)
3.阻断内源性过氧化物酶和血清封闭
切片加上过氧化物酶阻断剂 (货号:HKI0047) ,室温孵育25min,PBS洗涤后,在组化圈内滴加封闭液 (货号:HKW2085/86/87/99) 均匀覆盖组织,室温封闭30min。
4.加一抗、二抗
在切片上滴加用通用抗体稀释液 (货号:HKW2083) 按一定比例稀释的一抗,切片平放于湿盒4℃ 过夜孵育。加二抗:切片稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的二抗覆盖组织,避光室温孵育 50min。 (也可使用普通二抗,超敏二抗效果更佳) 。
5.加TSA 信号放大试剂
根据需要标记的荧光颜色加对应的TSA 放大试剂,孵育3-10min可具体根据预实验条件。如遇 标记效果差的可添加荧光增强剂进一步加强,增强剂:荧光试剂1:500正常孵育,浓度也可摸 索使用。
6 . 重复抗原修复从步骤 2可进行多色标记
7 . D A P I 复 染 细 胞 核
8 . 抗 荧 光 淬 灭 剂 封 片
9 . 相应荧光通道拍照或扫描
【注意事项】
1.本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3.HRP超敏山羊抗兔鼠通用二抗属于附赠试剂,不足100T剂量,可根据需要回购。
4.样本来源为兔 (或小鼠) ,若出现较高非特异性荧光着色,一抗为兔抗 (或鼠抗) 时,可 采用HRP标记的山羊抗兔IgG(货号:HKS23303) 或HRP标记的山羊抗小鼠IgG (HKS23301) 。
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