荧光原位杂交(FISH、IF 双染)

Tunel(白光)检测200元/张
Tunel(荧光)检测200元/张
IF Tunel 双染250元/张
Tunel( 芯片)550元/张
原位杂交(DAB 显色)240元/张
原位杂交(FISH 单标)240元/张
原位杂交(FISH、IF 双染)300元/张
原位杂交(FISH 双标)300元/张
原位杂交(FISH 三标)350元/张
原位杂交(芯片)500元/张
探针设计合成(一端标记、BIO)600元/张
探针设计合成(一端标记、DIG)1000元/张
探针设计合成(一端标记、FAM)1100元/张
探针设计合成(一端标记、Cy3)1900元/张
探针设计合成(两端标记、BIO)1200元/张
探针设计合成(两端标记、DIG)1960元/张
探针设计合成(两端标记、FAM)1400元/张
探针设计合成(两端标记、Cy3)2500元/张
项目介绍
  原位杂交与免疫荧光原理:原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。免疫荧光就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体或抗原上,与其相应的抗原或抗体结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。
  应用
  通过原位杂交及免疫荧光双染,可以在组织细胞中对核酸分子和蛋白指标同时进行共定位、以及定性分析,可以用来从共定位角度提示核酸和蛋白存在相互作用。
  实验流程
  石蜡切片荧光探针原位杂交与免疫荧光双标实验步骤
  
1. 组织固定、脱水、切片、石蜡切片脱蜡至水;
 
2. 消化:切片于修复液中煮沸10-15分钟,滴加蛋白酶K消化;
  
3. 预杂交:滴加预杂交液,37°C孵育1h。
  
4. 杂交:倾去预杂交液,滴加含探针 杂交液浓度 ,恒温箱 度杂交过夜。
  
5. 杂交后洗涤:SSC洗涤;
  
6. 孵育一抗、二抗:滴加一抗,4℃过夜,后PBS洗3×5min;滴加相应二抗,室温孵育50min,PBS洗3×5min;
  
7. DAPI复染核:切片滴加DAPI染液,避光孵育8min;
  
8. 镜检拍照;
  
样品保存运输
 组织冰冻切片
 组织切取需要部位,厚度在2mm 左右, PBS漂洗,干冰运输或立即置于固定液中。组织固定有原位杂交固定液
(动物)、原位杂交固定液(植物)、原位杂交固定液(较嫩植物),室温固定12小时(根据组织大小)以上,植物组织固定时需常温抽真空30min,再用纯水或PBS清洗两次后, 放入15%蔗糖溶液中,4℃脱水8小后,换30%蔗糖溶液4℃过夜。冰切时佩戴手套。冰冻切片放-20℃或-80℃保存备用。
 组织石蜡切片
 组织切取需要部位,厚度在2mm 左右, PBS漂洗后立即固定。动物组织用原位杂交固定液(动物),植物组织用原位杂交固定液(植物)或原位杂交固定液(较嫩植物),植物组织固定时需常温抽真空30min,固定12h以上。固定完成后脱水、包埋、切片。梯度酒精配制需用DEPC水。石蜡常规保存备用。
 标本运输
 冰冻切片:标本放原位杂交固定液中,常温运输;冰冻切片-20℃运输;新鲜组织干冰运输。交接单随样本一起,单独封装。
 石蜡切片:标本放原位杂交固定液中,常温运输;石蜡切片常温运输。交接单随样本一起,单独封装。
 细胞爬片:细胞爬片加原位杂交固定液后密封4℃运输。交接单随样本一起,单独封装。
 实验注意事项:
  
1. mRNA为检测对象时,需严格要求实验环境经无RNA酶处理;
  
2. FISH切片保存时间较短,应尽快取图;
  
3. 不同的抗体与原位杂交进行双标时,可能会有影响,必要时进行一定的实验步骤调整,以避免相互之间的影响;
上一篇: 下一篇:

推荐

  • 芯片扫描(荧光四标)

    1116

      产品介绍:   芯片扫描(荧光四标)可将玻璃切片上所有的信息进行采集形成高分辨率的数字切片,防止荧光的淬灭,永久保存。可任意倍数进行观...

    查看全文
  • 质粒小提(甘油菌)

    3100

      简介:   质粒转化:携带外源DNA片段的质粒进入感受体细胞后,在细胞中进行自我复制。多用于后期提取质粒。   质粒提取:即去除 RNA...

    查看全文
  • PCR产物电泳

    1386

      简介:荧光定量PCR是通过荧光染料(SYBR Green)或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的...

    查看全文
  • DNA ladder

    1928

      简介:在细胞凋亡时,内源性Mg、Ca依赖性核酸内切酶被激活,切割细胞DNA,使其成核小体间DNA链的断裂、大分子DNA链的断裂及DNA单链的断裂。其中以...

    查看全文

您好!请登录

点击取消回复
    展开更多
    点击展开我们的联系方式