产品组分 | 50T | 200T | 500T | 1000T |
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试剂A:内源性过氧化物酶阻断剂 | 5ml | 20ml | 50ml | 100ml |
试剂B:POLY-HRP羊抗鼠二抗 | 5ml | 20ml | 50ml | 100ml |
试剂C:DAB色原(20X) | 0.5ml | 1ml | 5ml | 5ml |
试剂D:DAB缓冲液 | 10ml | 20ml | 50ml | 100ml |
试剂E:一抗稀释液 | 5ml | 20ml | 50ml | 100ml |
试剂F:环保树脂封片剂 | 2.5ml | 10ml | 25ml | 50ml |
【产品简介】
本试剂盒为高灵敏度的两步法免疫组化试剂盒,适用于一抗来源为小鼠的抗体的后续显色。 试剂盒中包含辣根过氧化物酶 HRP 偶联标记的羊抗鼠 IgG,本产品适用于小鼠来源的一抗, 在 IHC、Western bLot 实验中,HRP 标记的羊抗鼠二抗与小鼠来源一抗结合后,再与 DAB 反 应。DAB 是辣根过氧化物酶 (HRP) 的底物,在 HRP 的催化下,DAB 产生棕色沉淀显色,实现 信号放大。
【储存与运输】
本试剂需低温运输,贮存于 4℃低温环境,有效期一年
【使用方法】
常规脱蜡水化:
石蜡切片经常规脱蜡和水化。
抗原热修复:
参照一抗说明书进行抗原修复。
DAB 工作液的配制:
按每毫升 DAB 缓冲液 (试剂 D) 中加入 50 μL DAB 色原 (试剂 C) (约 1 滴) 的比例配制 DAB 工作液,DAB 工作液应现配现用。配制好的 DAB 工作液需在 2 小时内使用,如出现沉淀, 使用前先混匀。
操作步骤:
1) 抗原修复完毕后自然冷却的切片,用自来水清洗。
2) 除去切片上组织周围的液体,用免疫组化笔圈定玻片上的待测组织区域并放入 PBST 缓 冲液中。
3) 取出切片,除去 PBST 缓冲液,滴加内源性过氧化物酶阻断剂 (试剂 A) (视切片大小 以完全覆盖切片组织为宜) ,于组织上孵育 10 分钟,用 PBST 清洗切片。
4)除去 PBST 缓冲液,滴加 100μL 左右一抗工作液(视切片大小以完全覆盖切片组织为宜), 于组织上进行孵育 (按照各自一抗说明书操作) 。一抗孵育完毕,用 PBST 清洗切片。
5) 除去 PBST 缓冲液,每张切片加酶标羊抗鼠/兔 IgG 聚合物 (试剂 B) 100μL 左右 (视切 片大小以完全覆盖切片组织为宜) ,室温下孵育 30 分钟。PBST 缓冲液清洗切片。
6) 用预备好的 DAB 工作液进行显色,每张切片加 100μL 左右 DAB 工作液 (视切片大小以 完全覆盖切片组织为宜) ,显色时间为 1-5 分钟 (镜检控制染色) ,用自来水冲洗终止显色反 应。
7) 需要时,使用苏木素染液复染。
8) 切片经过脱水,透明,封片。
注:若将本试剂应用于自动检测平台,需根据实际情况确认使用条件。
【注意事项】
1.本免疫显色试剂仅用于体外诊断,不作其他用途。
2.开始实验前,应仔细阅读此说明书。
3.请在试剂盒有效期内使用。
4.本免疫显色试剂仅限有专业经验或经专业培训的人员使用。
5.若将本产品中的组分和其他公司的产品混合使用,染色过程中可能出现异常情况。
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