BODIPY染色

【产品信息】

冰冻切片实验步骤
1、 冰冻切片固定：冰冻切片从冰箱拿出来复温，晾干水分，纯甲醇固定10min，待纯甲醇稍干后置于烤箱5min，然后置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
2、 染色：冰冻切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈（防止抗体流走），在圈内滴加BODIPY染液浓度
1:1000（浓度可根据预实验结果调整），避光恒温箱37°孵育30min。
3、 DAPI复染细胞核：玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加
DAPI染液，避光室温孵育10min。
4、 封片：玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片。
5、 镜检拍照：切片于尼康倒置荧光显微镜下观察并采集图像。
（紫外激发波长330-380nm，发射波长420nm；FITC绿光激发波长465-495nm，发射波长515-555 nm；CY3红光激发波长510-560，发射波长590nm）