免疫荧光(五标)

分子病理服务 592
免疫荧光(五标)

免疫荧光(五标)

荧光实验单标以及双标,预实验按正式实验正常收费,增加荧光放大(TSA)费用
  • 价格¥800
  • 货号HKF2009
  • 单位
  • 品牌浩克

产品介绍
产品参数
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【产品信息】

产品名称产品货号规格价格
免疫荧光(五标)HKF2009800元
、 石蜡切片免疫荧光实验步骤
1、 石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ12min-二甲苯Ⅱ12min-无水乙醇Ⅰ6min -95%酒精6min-85%
酒精6min蒸馏水洗。
2、 抗原修复:组织切片置于盛满柠檬酸抗原修复液(PH6.0)的修复盒中于微波炉内进行抗原修复,中火8min
停火8min中低火7min,此过程中应防止缓冲液过度蒸发,切勿干片。自然冷却后将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
3、 阻断内源性过氧化物酶:切片加上3%的双氧水,室温孵育25min,将玻片置PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
4、 血清封闭:在组化圈内滴加3%BSA 均匀覆盖组织,室温封闭30min。
5、 加一抗:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈(防止抗体流走),在圈内滴加按一定比例稀的抗体覆盖组织。切片平放于湿盒内4°C孵育过夜。
6、 加二抗:玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的二抗覆盖组织,避光室温孵育50min。
7、 信号放大:将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min 。滴加相对应颜色Flare信号放大试剂,3-5min.将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min 。双标或者多标的实验从这一步结束后重复步骤2-7,标记第二个、或者第三个抗体,最后在进入步骤8即可。
8、DAPI复染细胞核:玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加
DAPI染液,避光室温孵育10min。
9、封片:玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片。


 

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