Haokebio™ Rapid RNA FISH Kit（双标）

【产品信息】

【产品简介】

本试剂盒采用创新的树枝状杂交链式反应（HCR）技术，可快速、高效地检测目标RNA分子。试剂盒包含探针Ⅰ和探针Ⅱ，可单独用于单基因检测，亦可混合使用实现双基因同步检测，显著提升实验效率。检测原理：探针与靶RNA特异性结合后，暴露的扩增序列触发HCR扩增，形成携带大量荧光基团的树枝状核酸聚合物，信号强度大幅提升，可通过荧光显微镜或成像系统直观观测结果。

【探针信息】

探针Ⅰ（Alexa Fluor 488）：

探针Ⅱ（Cy3）：

【组织固定】

【储存与运输】

冰袋（wet ice）运输；-20℃长期保存,短期于4℃保存，有效期6个月。

【使用方法】

1. 脱蜡至水

依次将切片放入二甲苯Ⅰ15 min-二甲苯Ⅱ15 min-二甲苯Ⅲ15 min-无水乙醇10 min-90%酒精10 min-80%酒精10 min -70%酒精10 min -纯水冲洗。

2. 修复

细胞样本：等待切片完全干燥后，用组画笔画出大小合适的疏水圈，在原位杂交仪中或湿盒中水平放置切片。将100ul蛋白酶K修复液(1X)滴于组织上，37℃孵育10min，纯水冲洗终止反应。

冰冻切片：细胞样本：等待切片完全干燥后，用组画笔画出大小合适的疏水圈，在原位杂交仪中或湿盒中水平放置切片。将100ul蛋白酶K修复液(1X)滴于组织上，37℃孵育20min（冰冻切片），纯水冲洗终止反应。

石蜡切片：将装入玻片的玻片架放入修复槽，倒入1x柠檬酸6.0修复液（样本区域须被浸没），盖上盖子，用胶带纸封住，放入微波炉中，中火8min，停8min，中低火8min。自然冷却降温。

3. 封闭

取出切片，甩干切片上的液体，用组画笔画出大小合适的疏水圈，在原位杂交仪中或湿盒中水平放置切片，每张切片滴加100ul封闭液，37℃孵育30min，洗涤1次，每次5min。洗涤步骤：将装入玻片的玻片架放入洗液缸，倒入洗液（样本区域须被浸没），置于摇床上5min，转速为60。

4. 探针杂交

甩干切片上的液体，每张切片滴加100ul的探针Ⅰ或探针Ⅱ或探针Ⅰ和Ⅱ的混合探针（探针Ⅰ和探针Ⅱ以1：1比例混合），37℃孵育3h或以上，注意保持湿度以防干片。洗涤5次，每次5min。洗涤步骤：将装入玻片的玻片架放入洗液缸，倒入洗液（样本区域须被浸没），置于摇床上5min，转速为60。

5. DAPI染核

每张切片滴加50ul DAPI染液，避光孵育5min，纯水冲洗后滴加抗荧光淬灭封片剂封片。

【注意事项】

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作

本产品仅作科研用途。

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