HaoKebio™ Rapid RNA FISH Kit(Animal)

HaoKebio™ Rapid RNA FISH Kit(Animal)

  • 价格¥3000
  • 规格30T
  • 货号HKR11D
  • 单位
  • 品牌HaoKebio

产品介绍

【产品信息】

产品名称产品货号30T保存有效期
洗液(粉末溶解于10L ddH2O)HKR11-110L短期4℃长期-20℃12个月
HRP-鼠抗地高辛(100x)HKR11-230uL
TSA显色液570nm(200x)(可选)HKR11-33mL
封闭液HKR11-53mL
快速探针NR_HKR11-63mL

【产品简介】

RNA快速杂交试剂盒,适用于大于300bp的rna原位杂交,操作简单便捷,实验时间短。试剂盒中包含多条触发式探针,当探针与目标序列正确结合时,会暴露出放大序列,放大序列触发树叉状HCR形成了一个大分子核酸聚集体,每条核酸链上标记有地高辛,抗体识别地高辛进行显色。

【组织固定】

组织类型动物组织植物组织冰冻样本细胞爬片细胞
处理方式室温固定12h,石蜡包埋。抽真空固定1h,室温固定12h,石蜡包埋。15%蔗糖溶液中,4℃脱水8小时,换30%蔗糖溶,液4℃脱水8小时,OCT包埋。 4°固定2h左右。贴壁细胞用PBS清洗,加入多聚甲醛,将细胞刮下来,收集到离心管中,4℃固定2h,PBS清洗,琼脂糖包埋。
种类mRNAlncRNAcircRNAmiRNArRNA
处理方式室温固定12h室温固定12h(小于300bp固定24h)室温固定12h室温固定12h室温固定12h(小于300bp固定24h)

【储存与运输】

冰袋(wet ice)运输;-20℃长期保存,短期于4℃保存,有效期6个月。 

使用方法

1. 脱蜡至水

依次将切片放入二甲苯Ⅰ15 min-二甲苯Ⅱ15 min-二甲苯Ⅲ15 min-无水乙醇10 min-90%酒精10 min-80%酒精10 min -70%酒精10 min -纯水冲洗。

2. 修复

将装入玻片的玻片架放入修复槽,倒入1xEDTA9.0修复液(样本区域须被浸没),盖上盖子,用胶带纸封住,放入微波炉中,中火8min,停8min,中低火8min。自然冷却降温后,用3%双氧水封闭15min。

3. 封闭

取出切片,甩干切片上的液体,用组画笔(推荐HKR14P原位杂交专用组画笔)画出大小合适的疏水圈,在原位杂交仪中或湿盒中水平放置切片,每张切片滴加100ul封闭液,37℃孵育30min,洗涤1次,每次5min。洗涤步骤:将装入玻片的玻片架放入洗液缸,倒入洗液(样本区域须被浸没),置于摇床上5min,转速为60。

4. 探针杂交

甩干切片上的液体,每张切片滴加100ul的快速探针,37℃孵育2h-3h,注意保持湿度以防干片。洗涤5次,每次5min。洗涤步骤:将装入玻片的玻片架放入洗液缸,倒入洗液(样本区域须被浸没),置于摇床上5min,转速为60。

5. HRP-鼠抗地高辛

甩干切片上的液体,每张切片滴加100ul的HRP-鼠抗地高辛(1x),37℃湿盒孵育1h;洗涤5次,每次5min。洗涤步骤:将装入玻片的玻片架放入洗液缸,倒入洗液(样本区域须被浸没),置于摇床上5min,转速为60。

6. 显色

甩干切片上的液体,每张切片滴加100ul的TSA显色液,室温孵育10min。纯水冲洗,终止反应。

7. DAPI染核

每张切片滴加50ul DAPI染液,避光孵育5min,纯水冲洗后滴加抗荧光淬灭封片剂封片。

【注意事项】

1. 本产品仅作科研用途。

2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

【说明书下载】

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