【产品信息】

（注：荧光染料可查询荧光染料资料选择，本试剂盒荧光染料为默认选择,若选择Flare480超敏或Flare780超敏需要补差价）

【产品简介】

酪酰胺信号放大（TSA）系统可用于检测荧光免疫细胞化学（ICC）、免疫组织化学（IHC）中的低丰度靶点，可将信号灵敏度提高100倍。TSA 荧光试剂盒使用辣根过氧化物酶（HRP）直接催化固定化酶周围的荧光基团共价沉积，形成永久性共价键结合。在运用HRP二抗及一抗在微波热修复条件下脱离掉抗原失活的原理，重复此过程，即可实现同种属荧光双标及荧光三标以及多标（注：此过程仅适用于石蜡切片的荧光多标）。

此试剂盒中的荧光探针可单独或配合使用。超敏型Flare荧光染料的亮度比普通型Flare荧光染料高10倍以上，不再需要增强剂辅助，即可获得高亮度的荧光标记。

【储存与运输】

冰袋（wet ice）运输；4℃保存，有效期 12 个月。 

【使用方法】

1.脱蜡至水

依次将切片放入二甲苯 Ⅰ 8min→二甲苯 Ⅱ 8min→无水乙醇 Ⅰ 5min→无水乙醇 Ⅱ 5min→95%酒精 5min→85%酒精 5min→蒸馏水洗。

2.抗原修复（必须为抗原热修复）

组织切片置于盛满抗原修复缓冲液（PHxx）（货号：HKI0001/0002/0003/0004）的修复盒中于微波炉内进行抗原修复。中火8min至沸腾后，断电间隔8min，中低火 7min至沸，此过程中应防止缓冲液过度蒸发，切勿干片。（可自行摸索）

3.阻断内源性过氧化氢酶和血清封闭

切片加上过氧化物酶阻断剂（货号：HKI0047），室温孵育25min，PBS洗涤后，在组化圈内滴加封闭液（货号：HKI0009R/B/S）均匀覆盖组织，室温封闭30min。

4.加一抗、二抗

在切片上滴加用通用抗体稀释液（货号：HKW2083）按一定比例稀释的一抗，切片平放于湿盒4℃过夜孵育。加二抗：切片稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的二抗覆盖组织，避光室温孵育50min（也可使用普通二抗，超敏二抗效果更佳）。

5.加TSA信号放大试剂

根据需要标记的荧光颜色加对应的TSA 放大试剂(Flare超敏浓缩型：超敏染料稀释液=1:400)，孵育3-10min（具体根据预实验条件确定）。如遇标记效果差的可适当调整荧光试剂稀释比，正常孵育。

6. 重复抗原修复从步骤2可进行多色标记

7.DAPI复染细胞核

8.抗荧光淬灭剂封片

9.相应荧光通道拍照或扫描

（注：上述1-8步骤之间，除血清封闭后不用清洗外，各步骤之间都需用纯水或PBS充分浸洗）

【注意事项】

样本来源为兔（或小鼠），若出现较高非特异性荧光着色，一抗为兔抗（或鼠抗）时，可采用POLY-HRP羊抗兔鼠通用二抗(货号：HKI0029）或POLY-HRP羊抗鼠二抗（货号：HKI0027）。

本产品仅作科研用途。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

POLY-HRP羊抗兔二抗属于附赠试剂，不足100T剂量，可根据需要回购。