DAB缓冲液

【产品简介】

DAB 是过氧化物酶（POD）的显色底物，DAB 显色液主要用于免疫过氧化物酶法，适用于辣根过氧化物酶 HRP 标记的免疫印记或免疫组化反应。过氧化物酶催化底物发生反应，于反应部位产生棕色沉淀物，免疫印记可直接在膜上显示条带；免疫组化标本显色时间一般为室温 5-20分钟，随后在显微镜下观察显色情况，显色充分后应将标本及时脱水封固，其终产物可直接在光镜下观察，也可经 OsO4处理后，增加反应产物的电子密度，用于电镜观察。

本 DAB 缓冲液可保护过氧化氢及延缓 DAB 氧化作用，色原与底物缓冲液混合后，可延长保存。

【储存与运输】

-20℃避光密闭保存，一年有效，避免反复冻融；短期可 2-8℃保存。

【使用方法】

常规脱蜡水化：石蜡切片经常规脱蜡和水化。

抗原热修复：参照一抗说明书进行抗原修复。

DAB 工作液的配制：

按每毫升 DAB 缓冲液 (试剂 B) 中加入 50 μL DAB 色原 (试剂 A)  (约 1 滴) 的比例配制 DAB 工作液，DAB 工作液应现配现用。配制好的 DAB 工作液需在 2 小时内使用，如出现沉淀， 使用前先混匀。

操作步骤：

1) 抗原修复完毕后自然冷却的切片，用自来水清洗。

2) 除去切片上组织周围的液体，用免疫组化笔圈定玻片上的待测组织区域并放入 PBST 缓 冲液中。

3) 取出切片，除去 PBST 缓冲液，滴加内源性过氧化物酶阻断剂 (视切片大小以完全覆盖 切片组织为宜) ，于组织上孵育 10 分钟，用 PBST 清洗切片。

4)除去 PBST 缓冲液，滴加 100μL 左右一抗工作液(视切片大小以完全覆盖切片组织为宜)， 于组织上进行孵育 (按照各自一抗说明书操作) 。一抗孵育完毕，用 PBST 清洗切片。

5) 除去 PBST 缓冲液，每张切片加酶标羊抗鼠/兔 IgG 聚合物 100μL 左右 (视切片大小以 完全覆盖切片组织为宜) ，室温下孵育 30 分钟。PBST 缓冲液清洗切片。

6) 用预备好的 DAB 工作液进行显色，每张切片加 100μL 左右 DAB 工作液 (视切片大小以 完全覆盖切片组织为宜) ，显色时间为 1-5 分钟 (镜检控制染色) ，用自来水冲洗终止显色反 应。

7) 需要时，使用苏木素染液复染。

8) 切片经过脱水，透明，封片。

注：若将本试剂应用于自动检测平台，需根据实际情况确认使用条件。

【注意事项】

1.本免疫显色试剂仅用于体外诊断，不作其他用途。

2.开始实验前，应仔细阅读此说明书。

3.请在试剂盒有效期内使用。

4.本免疫显色试剂仅限有专业经验或经专业培训的人员使用。

5.操作时请穿实验服，并佩戴一次性手套。