简介:在细胞凋亡时,内源性Mg、Ca依赖性核酸内切酶被激活,切割细胞DNA,使其成核小体间DNA链的断裂、大分子DNA链的断裂及DNA单链的断裂。其中以核小体之间DNA断裂时最多见的一种断裂方式,断裂形成的DNA长度为核小体DNA长度的整数倍,即180~200bp的整数倍。通过提取凋亡细胞的基因组DNA在1.5~2%琼脂糖凝胶电泳,紫外灯下观察可见到特征性的“梯状”(ladder)DNA条带。此称DNA LADDER实验。而坏死的细胞DNA则成模糊的弥散条带。用于定性、定量检测细胞凋亡。

  实验步骤:样本处理-提取DNA-琼脂糖凝胶电泳-分析结果出报告

  实验周期:7个工作日

  实验要求:

  1、动物组织: 100mg(黄豆大小),最少50mg(绿豆大小),脂肪组织,结缔组织,纤维化组织适当增加,干冰运输。

  2、细胞:1×10^6个细胞,贴壁细胞舒展,未变圆,干冰运输;

DNA ladder

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