高尔基切片制作
1.准备好工具:30%蔗糖溶液,镊子,吸管,凝胶玻片
2.包埋组织
3.将切片机温度调至-13℃,温度太高不能成片,温度太低容易裂片。将切片厚度调至10um进行修片,修片完成再调至100um进行切片
4.将包埋块修至客户想要的位置,用手捂几秒让包埋块稍融,以免成片太厚切不出来
5.微抬防卷板,否则会因为切片太厚导致既不能成片,又破坏防卷板
5.用毛刷将片子轻轻按平,片子太皱后面贴片更容易叠片或者产生气泡
6.由于成片太厚,正常是贴不上片子的,还会有很多气泡,所以我们采用明胶玻片添加糖水辅助贴片。往明胶玻片上均匀滴一层糖水,再吸走多余的糖水,防止贴片时组织漂歪
7.用冻好的镊子将切片轻轻放在玻片上,注意手法,先贴住下沿,再慢慢往上贴,动作要轻柔匀速,保证无叠片和气泡
8.将切好的玻片水平放置一段时间,建议5分钟以上,让糖水沥干,玻片要避光保存
备注:由于高尔基染色切片太厚,成片时阻力很大,对切片机的探头和防卷板都是有很大损伤的,新手请谨慎操作。也建议提高切片收费。
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