流式表抗-单标

流式细胞术 8360

  简介:

  流式表抗:使用抗原-抗体反应的原理,运用流式细胞仪,检测细胞表面抗原或者胞内抗原的实验方法。另外,对于同一样品检测不同种抗原,可以分为单标、双标、三标。

  按照抗体是否直接标记荧光,可以分为直接标记法和间接标记法。

  实验流程:

  1、收集细胞:弃去上清,加入1 ml PBS清洗一次,弃上清,再加入1 ml 0.25%胰酶消化细胞,待细胞变圆且有部分细胞悬浮,即加入PBS终止消化。用移液枪轻轻吹打细胞,使细胞悬浮。细胞悬液转入离心管中,1500 rpm离心5 min收集细胞。

  2、PBS洗涤细胞:加入3 ml 4℃预冷的PBS完全重悬细胞,1500 rpm离心5 min,弃上清。沉淀震荡混匀。

  3、抗体标记

  1)直接标记法标记:加入100 µl直标抗体稀释液(PBS配制),避光染色30 min。

  2)间接标记法标记:

  加一抗:加入100 µl一抗抗体稀释液(PBS配制),室温孵育60 min。

  加二抗:孵育完后用预冷的PBS洗涤1次,1500 rpm离心5 min,弃上清。加入100 µl二抗抗体稀释液(PBS配制),避光室温孵育30 min。

  4、PBS洗涤细胞:加入500 ul 4℃预冷的PBS完全重悬细胞,1500 rpm离心5 min,弃上清。沉淀震荡混匀,用200 μL的4℃预冷的PBS重悬细胞。
 

  客户提供信息:

  1.提供抗体货号及厂家

  2.细胞信息

  3.实验要求
 

  样本寄送须知:

  细胞常温,血样4度运输
 

  交付结果:

  实验结果展示:
 

  流式表抗-单标

流式表抗-单标结果

流式表抗-单标

流式表抗-双标结果

上一篇: 下一篇:

相关推荐

  • 流式细胞周期

    677

      一、实验简介   细胞周期(Cell Cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,细胞的遗传物质复制并均等地分配给两个...

    查看全文
  • 流式细胞术

    724

      项目介绍   流式细胞术是运用流式细胞仪对细胞或颗粒进行光谱鉴定、细胞分选、计数,广泛用于分析细胞表面和细胞内分子的表达水...

    查看全文
  • 流式细胞凋亡

    445

      一、实验简介   磷脂酰丝氨酸(PS)是一种带负电荷的磷脂,正常情况下主要存在于细胞膜的内面。细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,其变化之一...

    查看全文
  • 流式ROS检测

    2146

      一、实验原理     活性氧簇ROS是由氧分子还原所形成的分子或者离子,大部分都是由线粒体产生的副产物,它们会在细胞代谢包括细胞...

    查看全文

您好!请登录

点击取消回复
    展开更多
    点击展开我们的联系方式