精子冻存

一、服务介绍

  由客户提供转基因或基因敲除雄鼠,将该小鼠精子采集后,采用程序降温的方法进行冷冻,保存在液氮中。

二、实验步骤

  1、雄鼠要求:阳性纯合子雄鼠,12~18W(最佳),生育能力良好,在实验前7d内进行过成功交配,而在3d内未交配过;

  2、取下雄鼠附睾后放入盛有矿物油的培养皿内清洗。在滤纸(吸水纸)上剔除附睾上的脂肪和血,体视显微镜观察是否干净。在精子冻存液R18S3滴清洗附睾,体视显微镜下将附睾剪碎,每隔一分钟轻摇几下,让精

子自由散开。取 10μL 精子,放在培养皿上(可以一次多取几滴)。用连接1ml注射器的三通阀依次吸入 HTF,空气,10μL精子,空气,上端吸到过滤塞处,下端用打火机封口。将麦管放入麦管保护套内,麦管套放入液氮

前要先扎数孔,10min后放入液氮罐内即可。

三、注意事项

  1、注意雄鼠选取要求

  2、麦管套放入液氮前要先扎数孔防止爆炸

四、结果展示
 

精子冻存

图a:卵子团
图b:受精后的卵子
图c:2细胞期胚胎
图d:未受精的单细胞

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