一、实验介绍
脑立体定位技术被广泛的运用于脑的损毁、刺激和脑电记录的精确定位中,成为研究脑结构和功能必不可少的工具。脑立体定位技术主要是使用脑立体定位仪作为定位仪器,利用某些颅骨外面的标志(如前囟、后
囟、外耳道、眼眶、矢状缝等)或其它参考点所规定的三度坐标系统,来确定皮层下某些神经结构的位置,以便在非直视暴露下对其进行定向的刺激、破坏、注射药物、引导电位等研究,是神经解剖、神经生理、神经药
理和神经外科等领域内的重要研究方法。常用的实验动物,如大鼠、小鼠、猫等高等哺乳动物以及鸟类,其均有完全的外耳道,可用(耳棒)来定位。在确定了颅外标记之后,就可按脑立体定位图谱所提供的数据进行定位
操作。
二、实验材料
脑立体定位仪,MC-5微操作仪,常规手术器械,钻孔针,纱布,干棉球,酒精,1%戊巴比妥钠,生理盐水,1ml注射器,3%双氧水,鼠。
三、实验步骤
1、动物麻醉:小鼠,体重20-30g,称重后以1%戊巴比妥钠腹腔麻醉注射时必须缓慢,随时注意动物状态。
2、小鼠头部固定:将小鼠的门齿固定于脑定位仪上颌固定器,然后把一侧的耳捧推入动物的外道后,使动物的头在处于两滑道正中。再将另一耳捧推入另一侧的外耳道。这时观察两个耳棒的刻度一致后,将两耳棒上的固定螺丝扭紧,在将牙齿固定器上压鼻环压下后扭紧(鼻环、耳棒的松紧度调节适宜为好),这时从各个方向推压动物头部"均不会出现移动。
3、开颅钻孔前的备皮:剪去动物头部毛,用2%碘酒及75%酒精棉球作头部皮肤的消毒,沿矢状缝作一3cm长的皮肤切口,分离皮下组织,用双氧水清洁颅骨表面的筋膜及肌肉并剥离,推开骨膜,暴露前囟、人字缝及矢状缝。
4、确定标准中线:将金属定位针向下移动到矢状缝上方后,再前后移动定位针,使定位针定位到前囟。
5、小鼠海马定位:用定位针在前囟后2mm, 矢状缝旁开2.5mm处定位一点,即为海马的平面位置,然后在此点上用钻孔针在颅骨上钻一小圆孔。
6、注射药物:小鼠海马则位于该圆孔下2 mm,将1ml注射器吸入药物安置到MC-5微操作仪上,操作仪器使注射器针头由小鼠脑钻孔处下降2mm时完成药物注射到小鼠脑海马处。
7、制作脑组织切片:将小鼠脑制作成切片,显微观察小鼠脑中红染料位置来验证小鼠脑海马中是否定位准确。
您好!请登录