【产品信息】
| 产品名称 | 产品货号 | 规格 | 价格 |
| 革兰氏染色 | HKF3029 | 张 | 25元 |
一、 实验原理
革兰氏染色法是微生物学中广泛使用的一种鉴别染色法，可用来区分革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-），基本原理是基于细菌细胞壁化学组分不同。细菌经结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成不溶于水的结晶紫-碘复合物。革兰氏阳性细菌由于细胞壁较厚，不含类脂，富含肽聚糖并交联形成致密网格结构，在用乙醇处理时肽聚糖网孔收缩，能将结晶紫-碘复合物阻留在细胞壁内，使其呈现结晶紫的紫色。而革兰氏阴性细菌因其细胞壁薄，肽聚糖含量低且交联松散。遇乙醇时富含类脂的外膜溶解，在细胞壁上出现较大缝隙，结晶紫-碘复合物流出，因此经乙醇脱色后细胞又成无色。此时再经番红复染，革兰氏阴性细菌将被染成红色。1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗。
2、革兰氏染色：切片滴加革兰氏染液A滴染10s-30s，水洗，甩干；滴加革兰氏染液B1min，水洗，甩干；巴氏吸管吸取革兰氏染液C从载玻片磨砂面一端冲洗组织进行分化，至切片流下的革兰氏染液C呈无色即可，水洗，甩干；将切片浸革兰氏染液D溶液1s水洗，镜检，烤箱烤干。
3、脱水：将烤干的切片快速入三缸无水乙醇快速脱水，依次1s、3s、5s。
4、透明封片：切片放入干净的二甲苯5min透明，中性树胶封片。
5、显微镜镜检，图像采集分析。
革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
注意事项：
1、染色过程中的革兰氏染液C分化是关键步骤，需注意分化程度。
2、尽量不要重复染色，分化液在脱去片子颜色的同时也改变了细胞壁的通透性，影响了最后结果的准确性。
3、冬季气温较低时，染色时间可适当延长。
杭州浩克生物
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