镀银染色

【产品信息】

镀银染色实验步骤
1、 石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。
2、 硝酸银反应：切片浸入20%硝酸银加盖于暗处反应20min。
3、 蒸馏水洗（在此期间配制银氨溶液）：染色第2步用过的20%硝酸银，逐滴加入氢氧化铵，边滴边搅拌，直到开始形成的白色沉淀又消失，银液变清即为银氨溶液。
4、 银氨液处理：切片浸入银氨液作用15min在此期间配制稀氨水，银氨液用于下步配制显影工作液）。稀氨水配制：蒸馏水30ml加氢氧化铵3滴。
5、 稀氨水中浸泡：切片移入稀氨水中浸泡（在此期间配制显影工作液）。显影储备液：甲醛液20ml+蒸馏水100ml+硝酸1滴+柠檬酸0.5g。显影工作液：取第4步用过的银氨液30ml，加入显影储备液3滴，混合均匀，即配即用不能保存。
6、 显色：切片浸入显影工作液中显色，约3-7min，镜下控制显色，金黄色的背景，神经纤维呈黑色时即取出。切片浸入第5步用过的稀氨水中浸泡1min。流水冲洗1min。
7、 去除未反应的银离子：5%硫代硫酸钠处理2min（固定已反应的银盐和除去未反应的银离子）。流水冲洗5min。
8、 脱水封片：将切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-无水乙醇Ⅰ5min -无水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脱水透明，将切片从二甲苯拿出来稍晾干，中性树胶封片。
9、 显微镜镜检，图像采集分析。