免疫荧光双标(芯片)

免疫荧光双标(芯片)

免疫荧光双标(芯片)

荧光实验单标以及双标,预实验按正式实验正常收费,增加荧光放大(TSA)费用
  • 价格¥800
  • 货号HKF2021
  • 单位
  • 品牌浩克

产品介绍
产品参数
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【产品信息】

产品名称产品货号规格价格
免疫荧光双标(芯片)HKF2021800元

服务介绍:

组织芯片免疫荧光染色,是将许多不同处理的组织以规则的微阵列方式排列于同一载体上,同时进行相同指标的免疫荧光检测。

一、实验器材及试剂

  1. 实验器材
名称厂家型号
脱水机湖北贝诺医疗科技有限公司JT-12S
生物组织自动包埋机湖北贝诺医疗科技有限公司JB-L5
转轮式切片机徕卡显微系统上海有限公司HistoCoreBIOCUT
石蜡包埋机(冷台)湖北贝诺医疗科技有限公司JB-L5
KD-P组织摊片机浙江金华科迪仪器设备有限公司51A011
烤箱天津市莱玻特瑞仪器设备有限公司GFL125
载玻片及盖玻片江苏汇达医疗器械有限公司710510    
微波炉美的M1-L213B
脱色摇床上海琪特分析仪器有限公司STS-3
涡旋仪秒生科技有限公司SI-A256
移液枪DragonKE003068
组化笔Gene techGT1001
荧光显微镜NIKONECLIPSE C1
  • 主要实验试剂
试剂厂家货号
无水乙醇杭州宏达化工仪器有限公司SJ003614
二甲苯国药集团化学试剂有限公司10023418
20x柠檬酸抗原修复液(PH6.0)杭州浩克生物技术有限公司HKI0003
PBS缓冲液杭州浩克生物技术有限公司 
BSA杭州浩克生物技术有限公司HK5021
一抗:xxxx红+xxxx绿  
二抗:HRP超敏山羊抗兔鼠通用二抗杭州浩克生物技术有限公司HKI0029
Flare520杭州浩克生物技术有限公司HKI0014
Flare570杭州浩克生物技术有限公司HKI0015
DAPI(即用型)杭州浩克生物技术有限公司HKI0005
抗荧光淬灭封片剂杭州浩克生物技术有限公司HKI0007-1
  • 石蜡切片免疫荧光实验步骤
  • 石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ12min-二甲苯Ⅱ12min-无水乙醇Ⅰ6min -95%酒精6min-85%酒精6min蒸馏水洗。
  • 抗原修复:组织切片置于盛满柠檬酸抗原修复液(PH6.0)的修复盒中于微波炉内进行抗原修复,中火8min停火8min中低火7min,此过程中应防止缓冲液过度蒸发,切勿干片。自然冷却后将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
  • 阻断内源性过氧化物酶:切片加上3%的双氧水,室温孵育25min,将玻片置PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
  • 血清封闭:在组化圈内滴加3%BSA 均匀覆盖组织,室温封闭30min。
  • 加一抗:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈(防止抗体流走),在圈内滴加按一定比例稀的抗体覆盖组织。切片平放于湿盒内4°C孵育过夜。
  • 加二抗:玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的二抗覆盖组织,避光室温孵育50min。
  • 信号放大:将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min 。滴加相对应颜色Flare信号放大试剂,3-5min.将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min 。双标或者多标的实验从这一步结束后重复步骤2-7,标记第二个、或者第三个抗体,最后在进入步骤8即可。

8、DAPI复染细胞核:玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加DAPI染液,避光室温孵育10min。

9、封片:玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片。

10、镜检拍照:切片于尼康倒置荧光显微镜下观察并采集图像。

Flare染料激发波长发射波长
DAPI 蓝色350420
Flare480青绿450480
Flare520绿490520
Flare570红550570
Flare620橙590620
Flare690粉630690

暂无

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