山羊抗兔二抗

　　产品简介：

本产品与DAB显色试剂盒配合使用是一个特别敏感的两步法免疫组化试剂盒，适用于一抗来源为兔的抗体。其中二抗为辣根过氧化物酶与山羊抗兔免疫球蛋白以摩尔比4：1结合而成的分子，该分子与兔来源一抗(先与抗原反应)结合后的大分子即标记有辣根过氧化物酶，再与DAB反应，得到棕黄色沉淀。由于该系统不含生物素和链霉亲和素，所以不受内源性生物素干扰。染色背景非常清晰。

包装内容：

保存条件：

-20℃保存，有效期12个月。

使用方法：

1. DAB工作液配制：每1ml DAB稀释液中加入20μl 50×DAB原液，混匀备用。也可根据试验结果再适当稀释后使用。

2. 常规切片脱蜡至水。

3. 于修复液中修复。一般为Tris-EDTA或柠檬酸修复液。

4. 过氧化物酶阻断剂(常用3%过氧化氢)于组织上避光孵育15分钟。蒸馏水冲洗。

5. 每张切片加入50-100μl一抗工作液，4℃过夜。

6. PBS冲洗三次，每次5分钟。

7. 每张切片加入50-100μl二抗工作液(二抗原液与pH7.4含0.05%Tween 20的PBS以1：200的比例稀释)，室温下孵育30-60分钟。

8. PBS冲洗三次，每次5分钟。

9. 每张切片加50-100μl新鲜配制的DAB工作液，室温下孵育。显微镜控制具体显色时间。

10. 显色完全后，蒸馏水或自来水冲洗。苏木素复染，0.1%盐酸分化，自来水冲洗返蓝。

11. 切片经过梯度酒精(70-100%)脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封片。

注意事项：

1. 如果为冰冻切片或细胞爬片，请将标本固定后自第3步开始。

2. 以上步骤仅供参考，请根据实际情况调整。