免疫组化/IHC
项目介绍
免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。
应用
组织细胞内具有抗原性(有对应抗体)的物质,如肽类、激素、神经递质、细胞因子、受体、表面抗原等等均可用免疫组织化学方法显示,因而目前在基础与临床科研中被广泛应用。无论是分子生物学,病理学,生物医学研究,动物学研究,都经常运用免疫组织化学方法对所研究的大分子分子进行定位,进而深入研究其功能。
结果展示
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肿瘤 vimentin 200× | 肺 α-SmA 200× |
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脑 IBA-1 200× | 胰腺 Ly6G 200× |
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肝脏 MPO 200× | 脾脏 CD3 200× |
免疫组化基本实验流程
实验步骤:
切片脱蜡至水-抗原修复-3%的双氧水处理-画圈-血清封闭-一抗4℃过夜孵育-二抗室温孵育-显色-苏木素染核-脱水、透明、封片-镜检
切片制备:
免疫染色前,组织样本固定于4%多聚甲醛中,以维持组织形态和抗原表位,利用自动脱水机对样本进行脱水,并将样本浸润于石蜡中。将浸润的石蜡样品制成蜡块。利用切片机切成3-5um的石蜡切片。
样品保存运输
注意事项:
1)石蜡切片制片,组织取样后应立即放入固定液中,避免冻存;
2)冰冻切片制片应取用新鲜组织,以免抗原丢失;
3)组织蜡块可以保存很长时间,但是石蜡切片理论上不能超过半年,冰冻切片不能超过3个月。
实验项目 | 标本要求 | 标本保存运输条件 | 可能存在风险 | 建议 |
石蜡切片 | 客户提供石蜡切片的,该切片放置时间不能超过半年 | 常温 | 放置超过了半年的石蜡切片存在抗原丢失的可能性,结果可能为阴性或阳性较低 | 如果有蜡块最好提供蜡块重新切片 |
冰冻切片 | 1. 厚度不要超过10um; 2. 提供的冰冻切片放置时间不能超过三个月; |
-20℃ | 1.20um厚的冰冻切片, 很容易掉片。 2、20um 厚的冰冻切片抗体不易进入导致假阴性结果 3. 放置超过三个月的冰冻切片,抗原丢失很严重。 |
1. 提供组织样品改做石蜡切片或者重新冰冻切片8-10um。 2. 放置超过三个月的切片建议重新切片 |
价格
服务项目 | 价格 |
免疫组化 | 30元/张 |
免疫组化(芯片) | 200元/张 |