β-半乳糖苷酶染色

染色 3660

  项目介绍:

  β-半乳糖甘酶染色,衰老细胞通常体积变会大,表达pH6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶。染色中以X-ga1(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)为底物,在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下,半乳糖苷键被水解生成深蓝色产物,光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。

 

  实验流程:

  (1)样本接收:细胞爬片、冰冻切片

  (2)实验步骤:β半乳糖染液孵育—染核—脱水封片

  (3)实验结果:染色好的玻片

 

  注意事项:

  1、β-半乳糖苷酶染色固定液有一定的腐蚀性和毒性,操作时请注意防护。

  2、β-半乳糖苷酶染色液B在刚刚溶解后会观察到有沉淀,属正常现象,充分混匀后,沉淀会全部溶解。使用前必须确保沉淀全部溶解,并且混匀。

  3、配制染色工作液时需使用聚丙烯容器或玻璃容器,不使用聚苯乙烯容器。但染色时可以在聚苯乙烯容器中进行。【聚丙烯容器可以高温高压灭菌,而聚苯乙烯容器不适合高温高压灭菌,一旦高温高压处理就会严重变形。】

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